浅谈高磷软锰矿脱磷菌的选育过程
培养基除查氏固体培养基、牛内膏蛋白胨培养基和PKO固体培养基外,还酸制了富磷培养基(蔗糖30g,硝酸钠2~3g,磷酸氢二钾1g,硫酸严铁0.01g,氯化钾0.5g,硫酸锰0.5g,蒸馏水1000mL)和缺磷+Cas(PO4)2培养基(葡萄糖10g,氯化钙0.2g,硫酸镁0.5g,硫酸铵2.0g,氯化钾0.2g,磷酸三钙0.9g,蒸馏水1000mL)。以上培养基均调整pH至7.0。矿样取自湖南永州市某锰矿、破碎,研磨至粒度小于0.1mm。矿样中ω(P)/ω(Mn)=0.0109,最好破碎机属高磷锰矿。
采用稀释平板分离法分离菌株,培养基为本氏培养基和年肉膏蛋白胨培养基。将所取土样制成10-3,10-4,10-5,10-6,10-7各种浓度的稀释液。将10-5~10-7稀释度的溶液接种到培养基上,放入恒温生化培养箱中于30℃下培养。初筛采用溶磷圈法。将分离获得的纯菌株接种于PKO固体培养基上,置于30℃培养箱中培7~15d,观察有无溶磷圈,雷蒙磨厂家并根据溶磷圈直径(D)与菌落直径(d)的比值初步确定脱磷能力。将有脱磷作用的分离物接种于斜面培养基上保存备用。
复筛时用无菌水将****斜面上的孢子洗下,用血小球计数板计数,调整菌液浓度大概到108个/mL。移取1mL该菌悬液接种于PKO液体培养基中,放在转速为150r/min的摇床上,于28℃下培养5d。将所得菌液于9000r/min离心机中分离15min,吸取上清液,用钼锑抗分光光度法测定其有效磷含量。